UltrAuFoil? 金微孔薄膜載網(wǎng)
這種新開發(fā)的超穩(wěn)定金支撐膜專為冷凍電子顯微鏡（cryo-EM）設(shè)計(jì)，可顯著減少冷凍樣品在成像過程中的移動(dòng)。這提升了圖像對(duì)比度與質(zhì)量，從而在使用更少數(shù)據(jù)的情況下獲得更優(yōu)的三維重構(gòu)結(jié)果。
在冷凍電鏡成像過程中，傳統(tǒng)的碳支撐膜會(huì)發(fā)生移動(dòng)——尤其是在電子束照射初期。這種移動(dòng)會(huì)導(dǎo)致圖像模糊，使得小分子或結(jié)構(gòu)復(fù)雜的生物大分子難以解析。
使用 UltrAuFoil?（由英國醫(yī)學(xué)研究理事會(huì)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室（MRC LMB）的 Christopher J. Russo 博士與 Lori A. Passmore 博士設(shè)計(jì)，Quantifoil Micro Tools 公司生產(chǎn)），可大幅降低樣品漂移。
項(xiàng)目 | 參數(shù) |
金箔厚度 | 約 500 ?（即 50 納米） |
金箔結(jié)構(gòu) | 規(guī)則方形陣列排列的微米級(jí)圓形孔洞 |
可用孔型 | R 1.2/1.3（其他型號(hào)可定制） |
TEM 載網(wǎng) | 300 目金網(wǎng)（其他規(guī)格可選） |
核心優(yōu)勢(shì)
· 超低漂移：金的高導(dǎo)電性 + 熱匹配設(shè)計(jì) → 成像期間樣品幾乎不動(dòng)；
· 高分辨潛力：特別適合小分子（<100 kDa）或柔性復(fù)合物的結(jié)構(gòu)解析；
· 兼容自動(dòng)化：已整合進(jìn)主流 Cryo-EM 自動(dòng)采集流程（如 EPU, SerialEM）。
典型應(yīng)用
· 單顆粒冷凍電鏡（SPA）
· 小蛋白、膜蛋白、病毒衣殼等挑戰(zhàn)性樣品
· 需要高精度對(duì)齊的電子斷層掃描（Cryo-ET）
使用注意事項(xiàng)
· 必須調(diào)整聚焦策略（不能依賴 Thon rings）；
· 建議新手先用標(biāo)準(zhǔn)碳膜練習(xí)，再過渡到金膜；
· 成本高于碳膜，適用于對(duì)數(shù)據(jù)質(zhì)量要求極高的項(xiàng)目。
Q1：為什么用金（gold）制作箔膜？
答：因?yàn)榻鹁哂懈邔?dǎo)電性、不氧化、抗輻照損傷，且其表面化學(xué)惰性、生物相容性好，非常適合高分辨冷凍電鏡。
碳膜在電子束下易充電、變形；而金導(dǎo)電性極佳，可迅速導(dǎo)走電荷，避免靜電漂移。
金在空氣中不氧化，長期穩(wěn)定性優(yōu)于銅或鎳。
Q2：為什么金箔厚度是 500 ?（50 nm）？
答：400–500 ? 是最佳厚度——既能有效抑制樣品移動(dòng)（與更厚膜效果相當(dāng)），又能在常規(guī)濾紙吸 blotting 條件下形成足夠薄的冰層。若低于 400 ?，支撐性能會(huì)下降。
太薄 → 機(jī)械強(qiáng)度不足，易破裂；
太厚 → 冰層變厚，不利于高分辨成像；
50 nm 是穩(wěn)定性與冰層厚度之間的最優(yōu)平衡點(diǎn)。
Q3：為什么 TEM 載網(wǎng)也用金？
答：使用同種金屬可消除冷卻過程中因熱膨脹系數(shù)不同導(dǎo)致的差異收縮，從而避免支撐膜幾何形變或張力變化。
若金膜貼在銅網(wǎng)上，降溫至液氮溫度（–196°C）時(shí)，銅與金收縮率不同 → 膜起皺或撕裂；
全金系統(tǒng)（膜+網(wǎng)）確保熱力學(xué)一致性，維持孔結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。
Q4：如何儲(chǔ)存 UltrAuFoil?？保質(zhì)期多久？
答：應(yīng)存放在載網(wǎng)盒中，置于避光、陰涼、低濕環(huán)境。雖無明確過期日，但建議兩年內(nèi)使用。
Q5：使用前是否需要處理？
答：無需預(yù)處理，開箱即用。但可通過標(biāo)準(zhǔn)輝光放電（glow discharge）或等離子體系統(tǒng)使其更親水，也可采用其他金表面改性方法。
注意：金本身疏水，對(duì)水溶液樣品鋪展不利，因此通常需做親水化處理。
Q6：如何設(shè)置電子束進(jìn)行數(shù)據(jù)采集？
答：推薦使用圓對(duì)稱電子束，中心對(duì)準(zhǔn)微孔，并覆蓋孔周圍一小圈金支撐區(qū)域。圖像應(yīng)在孔中心區(qū)域采集。
Q7：如何對(duì) UltrAuFoil? 聚焦？
答：由于金膜為晶體結(jié)構(gòu)，無非晶區(qū)，無法像碳膜那樣通過 Thon rings（振蕩對(duì)比度條紋）聚焦。推薦兩種簡單方法：
開啟束傾擺動(dòng)（beam tilt wobble），最小化圖像位移；
移除物鏡光闌，在孔邊緣觀察金晶格的衍射斑點(diǎn)，當(dāng)衍射斑與金晶格圖像相對(duì)位移最小時(shí)，即為焦平面。
關(guān)鍵點(diǎn)：傳統(tǒng)碳膜靠非晶背景產(chǎn)生 Thon rings 聚焦，而金膜是單晶或多晶，必須用衍射或束傾法聚焦。
Q8：如何校正像散（astigmatism）？
答：建議在使用 UltrAuFoil? 前，先用標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)樣品校正像散和束傾。
Q9：支持自動(dòng)化數(shù)據(jù)采集嗎？
答：支持。已成功在 UltrAuFoil? 上通過束傾聚焦法實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化數(shù)據(jù)采集。
Q10：UltrAuFoil? 是否易碎？
答：不比傳統(tǒng)碳膜更脆弱。但若用鑷子操作不當(dāng)，或在快速冷凍（plunge-freezing）過程中破裂，會(huì)嚴(yán)重?fù)p害其穩(wěn)定性。僅建議在膜完整、均勻的網(wǎng)格區(qū)域采集數(shù)據(jù)。
Q11：能否在其上加一層非晶碳連續(xù)膜？
答：可以。標(biāo)準(zhǔn)的“浮膜轉(zhuǎn)移法”（float transfer）可用于將薄層非晶碳轉(zhuǎn)移到 UltrAuFoil? 上。
應(yīng)用場景：某些對(duì)金表面吸附性差的樣品（如小蛋白），可加碳膜增強(qiáng)附著。
貨號(hào) | 產(chǎn)品描述 | 規(guī)格 |
Q250AR2A | UltrAufoil? 有孔金膜，R 2/2, 200 Mesh, Au | 50片/包 |
Q350AR13A | UltrAufoil? 有孔金膜， R 1.2/1.3, 300 Mesh, Au | 50片/包 |
Q350AR1A | UltrAufoil? 有孔金膜， R 0.6/1, 300 Mesh, Au | 50片/包 |
